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當(dāng)前位置:首頁(yè)產(chǎn)品中心生化檢測(cè)試劑盒-常量法土壤系列BC0155-100T/48S土壤纖維素酶(S-CL)活性檢測(cè)試劑盒

土壤纖維素酶(S-CL)活性檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

儲(chǔ)存條件
2-8℃
中文名稱
土壤纖維素酶(S-CL)活性檢測(cè)試劑盒
有效期
6個(gè)月
單位

英文名稱
Soil Cellulase(S-CL) Activity Assay Kit
檢測(cè)方法
微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
規(guī)格
100T/48S
自備試劑
該試劑盒實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需自備試劑,詳情見(jiàn)網(wǎng)站說(shuō)明書(shū)

產(chǎn)品型號(hào):BC0155-100T/48S

更新時(shí)間:2025-08-29

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

訪 問(wèn) 量 :1556

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產(chǎn)品介紹

土壤纖維素酶(S-CL)活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
微量法
貨號(hào):BC0155
規(guī)格:100T/48S
產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱規(guī)格保存條件
試劑一液體2.5 mL×1瓶(自備)2-8℃保存
試劑二液體5 mL×1瓶2-8℃保存
試劑三液體20 mL×1瓶2-8℃保存
試劑四液體6 mL×1瓶2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品粉劑×12-8℃保存
溶液的配制:


產(chǎn)品說(shuō)明:
S-CL主要來(lái)源于土壤微生物,S-CL催化農(nóng)作物秸稈產(chǎn)生的葡萄糖是主要的碳源營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。本產(chǎn)品采用3,5-二硝基水楊酸法測(cè)定S-CL催化纖維素降解產(chǎn)生的還原糖的含量。




注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、30~50目篩、研缽、甲苯(不允許快遞)和蒸餾水。
操作步驟:
一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量,具體比例可以參考文獻(xiàn))
新鮮土樣自然風(fēng)干或37℃烘箱風(fēng)干,過(guò)30~50目篩。
二、測(cè)定步驟
  1. 分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至540nm,分光光度計(jì)蒸餾水調(diào)零。

  2. 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:將標(biāo)準(zhǔn)品用蒸餾水稀釋至1、0.8、0.60.4、0.2、0.1mg/mL

  3. 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋表:

序號(hào)稀釋前濃度(mg/mL)標(biāo)準(zhǔn)液體積(µL)蒸餾水體積(µL)稀釋后濃度(mg/mL)
1101009001
21160400.8
31120800.6
41801200.4
51401600.2
61201800.1
試驗(yàn)中每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)管需15µL標(biāo)準(zhǔn)溶液。
4、操作表(在EP管中依次加入下列試劑)

對(duì)照管測(cè)定管標(biāo)準(zhǔn)管空白管
風(fēng)干土樣(g)0.050.05--
試劑一(μL2525--

煮沸15min(蓋緊)振蕩混勻,室溫放置15min--
試劑二(μL4545--
試劑三(μL185185--
蒸餾水(μL4545--
振蕩混勻,40℃水浴糖化1h 后,煮沸15min(蓋緊,防止水分散失),10000rpm常溫離心10min,取上清得糖化液。--
糖化液(μL1515--
標(biāo)準(zhǔn)液(μL--15-
蒸餾水(μL---15
試劑四(μL35353535
混勻, 沸水浴中煮沸顯色15min(蓋緊,防止水分散失),冷卻
蒸餾水(μL250250250250
混勻,冷卻后,取200μL至微量玻璃比色皿或96孔板中,測(cè)定540nm下吸光值A,分別記為A對(duì)照管、A測(cè)定管、A標(biāo)準(zhǔn)管、A空白管。計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A對(duì)照管,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管。每個(gè)測(cè)定管設(shè)定一個(gè)對(duì)照管。空白管和標(biāo)準(zhǔn)曲線只需做1-2次。
三、S-CL酶活計(jì)算
1、標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立:
標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度(y)為縱坐標(biāo),吸光度ΔA標(biāo)準(zhǔn)(x)為橫坐標(biāo)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線y=kx+b。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,將ΔA測(cè)定帶入公式中(x)計(jì)算樣本濃度ymg/mL)。
2、S-CL酶活計(jì)算:
單位的定義:每天每g土樣中產(chǎn)生1mg葡萄糖定義為一個(gè)酶活力單位。
S-CL酶活(U/g 土樣)=y×V反總÷W÷T =144×y
T:反應(yīng)時(shí)間,1h=1/24d;V反總:反應(yīng)體系總體積,0.3mL;W:樣本質(zhì)量,0.05g。
注意事項(xiàng):
若樣本測(cè)定管吸光度過(guò)小(0.02),可延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間,即40℃水浴糖化時(shí)間,最后計(jì)算時(shí)加以換算即可。
參考文獻(xiàn):
  1. Deng S P, Tabatabai M A. Cellulase activity of soils[J]. Soil Biology and Biochemistry, 1994, 26(10): 1347-1354.

  2. Sinegani A A S, Sinegani M S. The effects of carbonates removal on adsorption, immobilization and activity of cellulase in a calcareous soil[J]. Geoderma, 2012, 173: 145-151.

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土壤纖維素酶(S-CL)活性檢測(cè)試劑盒   



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