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專注于生物學試劑及試劑盒領域
服務熱線：18101056239
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產(chǎn)品型號：BC1490-50T/48S
更新時間：2025-08-28
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
訪 問 量 ：1228
010-50973130
產(chǎn)品分類
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可見分光光度法
貨號：BC1490
規(guī)格：50T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
| 試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
| 提取液一 | 液體50 mL×1瓶 | 常溫保存 |
| 提取液二 | 液體50 mL×1瓶 | 常溫保存 |
| 提取液三 | 液體50 mL×1瓶 | 常溫保存 |
| 提取液四 | 粉劑×1瓶 | 常溫保存 |
| 試劑一 | 液體25 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑二 | 液體25 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 標準品 | 液體1 mL×1支 | 2-8℃保存 |
技術(shù)指標：
低檢出限：0.00061 μmol/mL
線性范圍：0.000625-0.1 μmol/mL
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
天平、研缽/勻漿器、臺式離心機、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、蒸餾水。
操作步驟：
一、樣本處理（可適當調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）
稱取樣本約1g，破碎，加入1mL提取液一，沸水浴15min，冷卻至室溫，加入1mL提取液二，震蕩搖勻，加1mL 提取液三，用鑷子加少量提取液四（約2mg），靜置30min，10000rpm 離心15min，取上清液待測。
二、測定步驟：
可見分光光度計預熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至540nm，蒸餾水調(diào)零。
操作表
| 空白管 | 測定管 | 標準管 | |
| 樣本（µL） | - | 500 | - |
| 標準管（µL） | - | - | 500 |
| 蒸餾水（µL） | 500 | - | - |
| 試劑一（µL） | 500 | 500 | 500 |
| 試劑二（µL） | 500 | 500 | 500 |
| 混勻，室溫靜置15min，檢測A540吸光值。（空白管只需測定1-2次） | |||
三、亞硝酸含量計算：
按樣本質(zhì)量計算：
亞硝酸含量（μmol/g 質(zhì)量）=(A樣本-A空白）÷[(A標準-A空白)÷C標準]×V樣本÷(W×V樣本÷V總)
=0.12×[(A樣本-A空白）÷(A標準-A空白)] ÷W
按樣本蛋白濃度計算：
亞硝酸含量（μmol/mg prot）=(A樣本-A空白）÷[(A標準-A空白)÷C標準]×V樣本÷(Cpr×V樣本)
=0.04×[(A樣本-A空白）÷(A標準-A空白)]÷Cpr
V總：加入提取液體積，3mL；V樣本：反應中樣本體積，0.5mL；C標準：標準溶液濃度，0.04μmol/mL；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g。
注意事項：
試劑對人體有一定的危害，請穿實驗服，戴手套操作。
如果樣本吸光值大于1.3，建議將樣本用蒸餾水稀釋后進行測定。
實驗實例：
取1g榨菜破碎加入1mL提取液一，之后按提取步驟進行提取，取上清后按照測定步驟操作，測得計算A樣本=0.067、A空白=0.001、A標準=0.609，按樣本質(zhì)量計算含量得：
亞硝酸含量（μmol/g 質(zhì)量）=0.12×[(A樣本-A空白）÷(A標準-A空白)]÷W=0.013 μmol/g質(zhì)量。
取1g火腿破碎加入1mL提取液一，之后按提取步驟進行提取，取上清后按照測定步驟操作，測得計算A樣本=0.082、A空白=0.001、A標準=0.609，按樣本質(zhì)量計算含量得：
亞硝酸含量（μmol/g 質(zhì)量）=0.12×[(A樣本-A空白）÷(A標準-A空白)]÷W=0.016 μmol/g質(zhì)量。
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