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專注于生物學(xué)試劑及試劑盒領(lǐng)域
服務(wù)熱線：18101056239
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產(chǎn)品型號：BC4940-50T/48S
更新時間：2024-04-17
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
訪 問 量 ：850
010-50973130
產(chǎn)品分類
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貨號：BC4940
規(guī)格：50T/48S
產(chǎn)品內(nèi)容：使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
試劑一 | 液體5 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 液體2 mL×1瓶 | -20℃保存 |
試劑三 | 液體60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑四 | 液體5 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
標準品 | 粉劑×1支 | -20℃保存 |
溶液的配制：
標準品：臨用前加入0.8 mL試劑二，充分溶解，配制成10 mmol/L DMF標準液，2-8℃保存4周；再取40µL 10 mmol/L DMF標準液和60µL試劑二混合配制成成4 mmol/L標準溶液待測。
產(chǎn)品說明：
血清葡萄糖與白蛋白及其它血清蛋白分子N末端的氨基發(fā)生非酶促糖化反應(yīng)，形成高分子酮胺結(jié)構(gòu)，在堿性條件下與硝基四氯唑藍反應(yīng)，生成紫紅色化合物甲臜。在530nm波長處比色，測定其OD值，與DMF標準比較，即可求得其含量。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、恒溫培養(yǎng)箱、低溫離心機、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、冰和蒸餾水。
操作步驟：
一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）
血清（漿）：收集血清（漿）到離心管內(nèi)，按照血清（漿）體積（mL）∶試劑一體積（mL）= 10∶1的比例（建議吸取0.5 mL血清（漿）于EP管中，加入0.05 mL試劑一），充分混勻，于37℃保溫30 min。
二、測定步驟
1、 可見分光光度計預(yù)熱30 min以上，調(diào)節(jié)波長至530 nm，蒸餾水調(diào)零。
2、 標準溶液：按照標準溶液體積（mL）：試劑一體積（mL）= 10∶1的比例（建議吸取0.5 mL 4 mmol/L標準溶液于EP管中，加入0.05 mL試劑一），充分混勻，于37℃保溫30 min。
3、 按下表步驟加樣：
試劑名稱（μL） | 測定管 | 空白管 | 標準管 | 標準空白管 |
樣本 | 50 | |||
蒸餾水 | 50 | |||
標準溶液 | 50 | |||
試劑二 | 50 | |||
試劑三 | 1000 | 1000 | 1000 | 1000 |
37℃顯色15min | ||||
試劑四 | 50 | 50 | 50 | 50 |
充分混勻，取1 mL于1 mL玻璃比色皿中，于530 nm處測定吸光度。分別記為A測定、A空白、A標準、A標準空白。ΔA測定=A測定-A空白，ΔA標準=A標準-A標準空白。 | ||||
注：空白管和標準空白管均只需做1-2次。
三、糖化血清蛋白含量計算
糖化血清蛋白含量（mmol/L）=C×ΔA測定÷ΔA標準×F= 4×ΔA測定÷ΔA標準×F
C：標準溶液濃度，4 mmol/L；F：稀釋倍數(shù)。
注意事項：
1、顯色完成后，應(yīng)立即加入試劑四；建議一次性不要做太多樣本，防止試劑四加入不及時導(dǎo)致測定結(jié)果受到影響。
2、如果測定吸光值A(chǔ)＞1.0或ΔA＞0.8，建議稀釋樣本后再測定，計算公式中乘以稀釋倍數(shù)；如果測定吸光值較低或接近空白OD值，建議增加操作表中的樣本量后再進行測定（空白管、標準管、標準空白管需要增加至相同體積量）。
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