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產(chǎn)品中心生化檢測試劑盒-常量法輔酶Ⅱ系列BC2100-50T/48S6-磷酸葡糖糖酸脫氫酶（6PGDH）測試盒 輔酶
產(chǎn)品型號(hào)：BC2100-50T/48S
更新時(shí)間：2024-04-08
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
訪 問 量 ：1915
010-50973130
產(chǎn)品分類
相關(guān)文章
6-磷酸葡萄糖酸
脫氫酶（6PGDH）活性檢測試劑盒說明書
紫外分光光度法
貨號(hào): BC2100
規(guī)格: 50T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。
| 試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
| 試劑一 | 液體100 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑二 | 粉劑×1瓶 | -20℃保存 |
| 試劑三 | 粉劑×1瓶 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
試劑二：臨用前配制，加入5 mL試劑一，混勻；
試劑三：臨用前配制，加入5 mL試劑一，混勻。
產(chǎn)品說明：
磷酸戊糖途徑途徑中6-磷酸葡萄糖脫氫酶（G6PDH）和6-磷酸葡萄糖酸脫氫酶（6PGDH）依次催化NADPH合成，與能量的平衡、生長速率和細(xì)胞活力等密切相關(guān)。此外，6PGDH逆境生理中具有重要作用。
6PGDH催化6-磷酸葡萄糖酸和NADP+生成NADPH，NADPH在340nm有特征吸收峰，而NADP+沒有；通過測定340nm吸光度增加速率，計(jì)算6PGDH活性。
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、1mL石英比色皿、研缽/勻漿器、蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項(xiàng)：
樣本處理等過程均需要在冰上進(jìn)行，且須在提取當(dāng)日完成酶活性測定，粗酶液避免反復(fù)凍融；
試劑二和試劑三須現(xiàn)配現(xiàn)用，當(dāng)天未用完試劑保存在4℃，可保存1周。
若樣本初始（0s）讀值大于0.5且ΔA測定小于0.1，可嘗試將樣本進(jìn)行稀釋后測定。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：
稱約0.1g腎臟組織，加入1mL試劑一，冰上充分研磨，10000rpm 4℃離心10min，取上清稀釋10倍，測得計(jì)算ΔA測定=A2測定-A1測定=0.256-0.154=0.102，ΔA空白=A2空白-A1空白=0，按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得：
6PGDH酶活性(U/g 質(zhì)量) =536×(ΔA測定-ΔA空白)÷W×10（稀釋倍數(shù)）=5467.2 U/g 質(zhì)量。
相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn)：
Wu S, Wang H, Li Y, et al. Transcription factor YY1 promotes cell proliferation by directly activating the pentose phosphate pathway[J]. Cancer research, 2018, 78(16): 4549-4562.
相關(guān)系列產(chǎn)品：
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6-磷酸葡糖糖酸脫氫酶（6PGDH）測試盒 輔酶 6-磷酸葡糖糖酸脫氫酶（6PGDH）測試盒 輔酶
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