北京索萊寶科技有限公司
專注于生物學(xué)試劑及試劑盒領(lǐng)域
服務(wù)熱線：18101056239
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產(chǎn)品型號：BC4270-50T/48S
更新時間：2024-04-15
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
訪 問 量 ：1872
010-50973130
產(chǎn)品分類
| 試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
| 試劑一 | 液體60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑二 | 液體50 mL×1瓶（自備） | 2-8℃保存 |
| 試劑三 | 液體30 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑四 | - | 2-8℃保存 |
| 試劑五 | 液體6 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑六 | 液體10mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 標(biāo)準(zhǔn)品 | 粉劑×1支 | 2-8℃保存 |
試劑二：*50 mL自備。
試劑四：提供125 mL空瓶一個；將試劑三：H2O =9 mL：91 mL混勻，現(xiàn)用現(xiàn)配，2-8℃保存半年。
標(biāo)準(zhǔn)品：10 mg支鏈淀粉。臨用前加入0.1 mL無水乙醇和0.9 mL試劑三，混勻后封口膜封口，沸水浴至溶解，即10 mg/mL的支鏈淀粉，2-8℃保存半年。
稱取0.005g烘干樣本，加入1mL試劑一，充分勻漿；
80℃水浴提取30min，3000g，25℃離心5min，棄上清，留沉淀；
在步驟2沉淀中加入1mL試劑二（*）振蕩 5min；3000g，25℃離心5min，棄上清，留沉淀；
在步驟3沉淀中加入5mL試劑四充分溶解，90℃水浴10min，冷卻后3000g，25℃離心5min，取上清待測。
分光光度計預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)雙波長至530nm和755nm，蒸餾水調(diào)零。
標(biāo)準(zhǔn)液的稀釋：將10 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液用試劑四稀釋至0.5、0.4、0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125 mg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液待測。
標(biāo)準(zhǔn)液稀釋可參考下表：
| 序號 | 稀釋前濃度（mg/mL） | 標(biāo)準(zhǔn)液體積（µL） | 試劑四體積（µL） | 稀釋后濃度（mg/mL） |
| 1 | 10 | 100 | 1900 | 0.5 |
| 2 | 0.5 | 800 | 200 | 0.4 |
| 3 | 0.4 | 500 | 500 | 0.2 |
| 4 | 0.2 | 500 | 500 | 0.1 |
| 5 | 0.1 | 500 | 500 | 0.05 |
| 6 | 0.05 | 500 | 500 | 0.025 |
| 7 | 0.025 | 500 | 500 | 0.0125 |
操作表：(在1.5mL離心管中依次加入下列試劑)
| 試劑名稱 | 測定管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 空白管 |
| 樣本（µL） | 200 | - | - |
| 標(biāo)準(zhǔn)溶液（μL） | - | 200 | - |
| 蒸餾水（µL） | - | - | 200 |
| 試劑五（µL） | 75 | 75 | 75 |
| 試劑六（µL） | 50 | 50 | 50 |
| 蒸餾水（µL） | 675 | 675 | 675 |
| 充分混勻，測定530nm和755nm處的吸光值，530nm下的測定管、標(biāo)準(zhǔn)管、空白管分別記為A測定、A標(biāo)準(zhǔn)和A空白，755nm下的分別記為A’測定、A’標(biāo)準(zhǔn)、A’空白，計算ΔA測定=（A測定-A空白）-（A’測定-A’空白），ΔA標(biāo)準(zhǔn)=（A標(biāo)準(zhǔn)-A空白）-（A’標(biāo)準(zhǔn)-A’空白）。標(biāo)準(zhǔn)曲線和空白管只需測定1-2次。 | |||
標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
支鏈淀粉含量（mg/g 質(zhì)量）=x×V樣總÷W=5x÷W
反應(yīng)后建議在20min內(nèi)檢測完成防止褪色。
如果測定吸光值超過線性范圍吸光值，可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進(jìn)行測定。注意同步修改計算公式。
取0.01g紅豆于研缽中研碎，加入1mL試劑一，進(jìn)行樣本處理取上清3倍稀釋后按照測定步驟操作，測得計算ΔA測定=（A測定-A空白）-（A’測定-A’空白）=（0.370-0.045）-（0.233-0.015）=0.107，帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線y=0.7564x-0.0006計算x=0.1423，按樣本質(zhì)量計算含量得：
支鏈淀粉含量檢測試劑盒
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