土壤堿性蛋白酶（S-ALPT）活性檢測試劑盒說明書
微量法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動，請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號：BC0885
規(guī)格：100T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑二：臨用前取1瓶加入6 mL試劑一，沸水浴攪拌溶解后待用，用不完的試劑可以2-8℃保存4周；

2. 標(biāo)準(zhǔn)品：20 μmol/mL 酪*酸溶液。

產(chǎn)品說明：
土壤蛋白酶參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質(zhì)以及其他含蛋白質(zhì)氮的有機(jī)化合物的轉(zhuǎn)化，其水解產(chǎn)物是高等植物的氮源之一。土壤堿性蛋白酶在堿性環(huán)境下催化蛋白質(zhì)水解，與土壤有機(jī)質(zhì)含量、氮素及其他土壤性質(zhì)有關(guān)。堿性條件下，土壤堿性蛋白酶可將酪蛋白水解產(chǎn)生酪*酸；在堿性條件下，酪*酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍(lán)，在680nm有特征吸收峰。
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽、蒸餾水、30-50目篩。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項(xiàng)：
當(dāng)吸光值大于1.5時，建議將上清液用蒸餾水稀釋后進(jìn)行測定，計(jì)算時注意乘以稀釋倍數(shù)。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1. 分別稱取0.05g三葉草土于1.5mLEP管中，分別為對照管及測定管，按照測定步驟操作，用96孔板測定吸光度，計(jì)算ΔA測定=A測定-A對照=0.234-0.180=0.054，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白=0.374-0.045=0.329，按土壤質(zhì)量計(jì)算酶活得：

土壤堿性蛋白酶(U/g 土樣)=0.05×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W= 0.05×0.054÷0.329÷0.05=0.1641 U/g土樣。

1. 分別稱取0.05g森林10號土樣于1.5mLEP管中，分別為對照管及測定管，按照測定步驟操作，用96孔板測定吸光度，計(jì)算ΔA測定=A測定-A對照=0.829-0.566=0.263，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白=0.374-0.045=0.329，按土壤質(zhì)量計(jì)算酶活得：

土壤堿性蛋白酶(U/g 土樣)=0.05×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W= 0.05×0.263÷0.329÷0.05=0.7994 U/g土樣。
相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn)：
[1]Manyun Zhang,Jun Wang, Shahla Hosseini Bai,et al. Evaluating the effects of phytoremediation with biochar additions on soil nitrogen mineralization enzymes and fungi. Environmental Science and Pollution Research. May 2018;(IF2.914)
[2]Zhang M, Wang W, Wang J, et al. Dynamics of biochemical properties associated with soil nitrogen mineralization following nitrification inhibitor and fungicide applications[J]. Environmental Science and Pollution Research, 2017, 24(12): 11340-11348.
相關(guān)系列產(chǎn)品：
BC0270/BC0275 土壤中性蛋*酶活性檢測試劑盒
BC0860/BC0865 土壤酸性蛋白酶活性檢測試劑盒

土壤堿性蛋白酶活性檢測試劑盒 微量法 土壤堿性蛋白酶活性檢測試劑盒 微量法