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北京索萊寶科技有限公司

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當(dāng)前位置：首頁(yè)產(chǎn)品中心生化檢測(cè)試劑盒-微量法微量法生化試劑盒BC2575-100T/48Sα-半乳糖苷酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法

α-半乳糖苷酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

儲(chǔ)存條件
-20℃
中文名稱
α-半乳糖苷酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法
有效期
6個(gè)月
單位
盒
英文名稱
α-galactosidase(α-GAL) Activity Assay Kit
別名
α-半乳糖苷酶試劑盒 α-GAL Kit α-半乳糖苷酶（α-GAL）試劑盒 α-半乳糖苷酶（α-GAL）測(cè)試盒
檢測(cè)方法
微量法 Spectrophotometer/Microplate Reade

產(chǎn)品型號(hào)：BC2575-100T/48S

更新時(shí)間：2024-04-11

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

訪 問(wèn) 量 ：781

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α-半乳糖苷酶（α-GAL）活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
微量法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng)，請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說(shuō)明書(shū)操作。
貨號(hào)：BC2575
規(guī)格：100T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱規(guī)格保存條件
提取液液體100 mL×1瓶2-8℃保存
試劑一粉劑×2支-20℃保存
試劑二液體4 mL×1瓶2-8℃保存
試劑三液體15 mL×1瓶2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品液體1 mL×1支2-8℃保存
溶液的配制：
1、試劑一：臨用前取1支加入1.25 mL蒸餾水，充分溶解備用；用不完的試劑-20℃分裝保存4周，避免反復(fù)凍融（1瓶粉劑溶解后可做100T，為了延長(zhǎng)使用時(shí)間，此產(chǎn)品多給1瓶粉劑）；
2、標(biāo)準(zhǔn)品：5 μmol/mL的對(duì)硝基 苯*溶液。
產(chǎn)品說(shuō)明：
α-GAL (EC 3.2.1.22)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，能專一地催化α-半乳糖苷鍵的水解，主要參與棉子糖、水蘇糖、蜜二糖和半乳甘露聚糖等半乳糖苷的降解。α-GAL對(duì)于植物種子的萌發(fā)至關(guān)重要，種子萌發(fā)初期，其催化產(chǎn)生的D-半乳糖通過(guò)糖酵解途徑迅速轉(zhuǎn)化和消耗，為種子的萌發(fā)提供最初的能量來(lái)源，后期則主要參與細(xì)胞壁儲(chǔ)藏多糖水解。
α-GAL分解對(duì)-硝基 苯-α-D-吡喃半乳糖苷生成對(duì)-硝基 苯*，后者在400nm有最大吸收峰，通過(guò)測(cè)定吸光值升高速率來(lái)計(jì)算α-GAL活性。

注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、低溫離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液器、超聲破碎儀、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見(jiàn)“產(chǎn)品資料"附件
一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）
1、細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞的處理：收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照每500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（功率200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），15000g，4℃，離心20min，取上清，置冰上待測(cè)。
2、組織的處理：稱取約0.1g組織，加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿；15000g，4℃，離心20min，取上清，置冰上待測(cè)。
 

  • 測(cè)定步驟

  1. 分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至400nm，分光光度計(jì)蒸餾水調(diào)零。

  2. 標(biāo)準(zhǔn)液的稀釋：將標(biāo)準(zhǔn)液用蒸餾水稀釋至200、100、50、25、12.5、6.25、0nmol/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液待測(cè)。

  3. 標(biāo)準(zhǔn)液稀釋可參考下表：

序號(hào)稀釋前濃度（nmol/mL）標(biāo)準(zhǔn)液體積（µL）蒸餾水體積（µL）稀釋后濃度（nmol/mL）
15000801920200
220010001000100
31001000100050
4501000100025
5251000100012.5
612.5100010006.25
76.25010000（空白管）
備注：實(shí)驗(yàn)中每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)管需70µL標(biāo)準(zhǔn)溶液。

  1. 樣本測(cè)定（在EP管或96孔板中依次加入下列試劑）：

試劑名稱（μL）測(cè)定管對(duì)照管標(biāo)準(zhǔn)管
試劑一25--
蒸餾水-25-
試劑二3535-
樣本 1010-
迅速混勻，放入37℃水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱中準(zhǔn)確反應(yīng)30min
標(biāo)準(zhǔn)品--70
試劑三130130130
充分混勻，室溫靜置2min后，于400nm處測(cè)定吸光值A，分別記為A測(cè)定管、A對(duì)照管、A標(biāo)準(zhǔn)管、A空白管。計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定管-A對(duì)照管，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管。每個(gè)測(cè)定管需設(shè)一個(gè)對(duì)照管。標(biāo)準(zhǔn)曲線和空白管只需測(cè)1-2次。

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BC0340/BC0345  糖原含量檢測(cè)試劑盒
BC0360/BC0365  β-1,3葡聚糖酶（β-1,3-GA）活性檢測(cè)試劑盒
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α-半乳糖苷酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法 α-半乳糖苷酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法

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