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當前位置:首頁產品中心生化檢測試劑盒-微量法微量法生化試劑盒BC2215-100T/96S3-磷酸甘油醛脫氫酶活性檢測試劑盒 微量法

3-磷酸甘油醛脫氫酶活性檢測試劑盒 微量法
產品簡介:

儲存條件
-20℃
中文名稱
3-磷酸甘油醛脫氫酶活性檢測試劑盒 微量法
有效期
6個月
單位

推薦
若使用96孔板測定,需使用96孔UV板,推薦貨號YA0602
英文名稱
Glyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogenase(GAPDH) Activity Assay Kit
別名
3-磷酸甘油醛脫氫酶試劑盒 GAPDH Kit 3-磷酸甘油醛脫氫酶(GAP

產品型號:BC2215-100T/96S

更新時間:2024-04-11

廠商性質:生產廠家

訪 問 量 :1112

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產品介紹


3-磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)活性檢測試劑盒說明書
微量法
貨號: BC2215
規(guī)格:100T/96S
產品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱規(guī)格保存條件
提取液液體100 mL×1瓶2-8℃保存
試劑一粉劑×1瓶-20℃保存
試劑二液體20 mL×1瓶2-8℃保存
試劑三液體12 µL×1瓶2-8℃保存
溶液的配制:
  1. 試劑三:液體置于試劑瓶內EP管中。根據用量按照試劑三:蒸餾水為3:100的體積比例充分混勻,現(xiàn)用現(xiàn)配;

  2. 工作液的配制:將試劑二全部倒入試劑一瓶中,充分溶解,根據需要取一定的量37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預熱10min;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。

產品說明:
GAPDH(EC1.2.1.12)催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸,是糖酵解途徑的關鍵酶,與糖異生途徑、體內血糖濃度的維持和糖尿病的發(fā)生密切相關,在機體糖、脂、蛋白代謝紊亂疾病中發(fā)揮重要作用。
3-磷酸甘油酸激酶催化三磷酸甘油酸和ATP生成1,3-二磷酸甘油酸。GAPDH逆向催化1,3-二磷酸甘油酸和NADH生成3-磷酸甘油醛、無機磷和NAD+,340nm處測定NADH的減少量可反映GAPDH活性的高低。
注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計/酶標儀、低溫離心機、水浴鍋、微量石英比色皿/96孔UV板、可調式移液槍、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產品資料"附件
注意事項:
  1. 當A1小于0.8或ΔA大于0.7時(96孔板為A1小于0.4或ΔA大于0.4),建議將樣本稀釋后再進行測定。

  2. 空白管為檢測各試劑組分質量的檢測孔,正常情況下,變化不超過0.02。

實驗實例:
  1. 取0.1g兔腎臟加入1mL提取液,進行冰浴勻漿,然后8000g,4℃,離心20min,取上清置冰上,之后按照測定步驟操作,用微量石英比色皿測得計算ΔA測定管= A1測定-A2測定=0.9333-0.2289=0.7044,ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.9322-0.9274=0.0048,ΔA=ΔA測定管-ΔA空白管=0.6996,按樣本質量計算酶活得

GAPDH酶活(U/g質量)=1072×ΔA÷W=7499.7 U/g質量。
  1. 取0.1g三葉草加入1mL提取液,進行冰浴勻漿,然后8000g,4℃,離心20min,取上清置冰上,之后按照測定步驟操作,用微量石英比色皿測得計算ΔA測定管=A1測定-A2測定=1.0184-1.0042=0.0142,ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.9322-0.9274=0.0048,ΔA=ΔA測定管-ΔA空白管=0.0094,按樣本質量計算酶活得:

GAPDH酶活(U/g質量)=1072×ΔA÷W=100.77 U/g質量。
  1. 取兔血清直接檢測,用微量石英比色皿測得計算ΔA測定管=A1測定-A2測定=0.9528-0.9303=0.0225,ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.9322-0.9274=0.0048,ΔA=ΔA測定管-ΔA空白管=0.0177,按血清(漿)體積計算酶活得:

GAPDH酶活(U/mL)=1072×ΔA=18.974 U/mL。
相關系列產品:
BC0990/BC0995 植物葉綠素含量檢測試劑盒
BC4330/BC4335 植物類胡蘿卜素含量檢測試盒
 

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