葡萄糖氧化酶（GOD
）活性檢測(cè)試劑盒說明書
微量法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng)，請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號(hào)：BC0695
規(guī)格：100T/96S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 工作液的配制：取15 mL試劑一和3 mL試劑二混勻（現(xiàn)配現(xiàn)用）；

2. 試劑三：融化后可分裝-20℃保存。

產(chǎn)品說明：
GOD（EC 1.1.3.4）廣泛存在于動(dòng)物和植物中，催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸，并產(chǎn)生H₂O₂，是生物體中產(chǎn)生活性氧的代謝途徑之一。
GOD催化葡萄糖產(chǎn)生H₂O₂，過氧化物酶在有氧存在時(shí)催化H₂O₂分解產(chǎn)生的氧又將鄰聯(lián)茴香胺氧化生成有色物質(zhì)，顏色深淺與葡萄糖氧化酶活性成線性關(guān)系。
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器/細(xì)胞超聲破碎儀、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項(xiàng)：

1. 不同勻漿組織中GOD活力不一樣，做正式試驗(yàn)之前請(qǐng)做1-2次預(yù)試驗(yàn)，若A2-A1>0.8，則說明組織活力太高，必須用提取液稀釋成適當(dāng)濃度勻漿上清液，使A2-A1<0.8，以提高檢測(cè)靈敏度。實(shí)驗(yàn)過程中若出現(xiàn)A1> A2現(xiàn)象請(qǐng)將樣本用提取液稀釋成適當(dāng)濃度。

2. 最好兩個(gè)人同時(shí)做此實(shí)驗(yàn)，一個(gè)人比色，一個(gè)人計(jì)時(shí)，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn)：

1. Yan Ma,Zhe Chi,Yanfeng Li,et al. Cloning, deletion, and overexpression of a glucose oxidase gene in Aureobasidium sp. P6 for Ca²⁺-gluconic acid overproduction. Annals of Microbiology. October 2018;(IF1.431)

2. Zhao S F, Jiang H, Chi Z, et al. Genome sequencing of Aureobasidium pullulans P25 and overexpression of a glucose oxidase gene for hyper-production of Ca²⁺-gluconic acid[J]. Antonie Van Leeuwenhoek, 2019, 112(5): 669-678.

參考文獻(xiàn)：

1. Han K, Wu Z, Lee J, et al. Activity of glucose oxidase entrapped in mesoporous gels[J]. Biochemical engineering journal, 2005, 22(2): 161-166.

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