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專注于生物學(xué)試劑及試劑盒領(lǐng)域
服務(wù)熱線：18101056239
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產(chǎn)品型號：BC0080-50T/24S
更新時間：2025-08-25
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
訪 問 量 ：2109
010-50973130
產(chǎn)品分類
相關(guān)文章
硝酸還原酶（NR）檢測測試盒 氮代謝
產(chǎn)品規(guī)格：50管/24樣 產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存； 參考價格：300
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨
關(guān)鍵字: 硝酸還原酶檢測試劑盒|NR檢測試劑盒|硝酸還原酶|試劑盒
簡要介紹：
NR廣泛存在于植物中，是植物硝態(tài)氮轉(zhuǎn)化為氨態(tài)氮的關(guān)鍵酶，也是誘導(dǎo)酶，對作物的產(chǎn)量和品質(zhì)有影響。
NR催化硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，NO3ˉ+NADH+H＋→NO2ˉ+NAD＋+H2O ；產(chǎn)生的亞硝酸鹽能夠在酸性條件下，與對氨基ben磺酸及α-萘胺定量生成紅色偶氮化合物；生成的紅色偶氮化合物在540 nm有大吸收峰，可用分光光度法測定。
產(chǎn)品詳細描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
誘導(dǎo)劑儲備液：液體50mL×1瓶，4℃保存。
提取液：液體25mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體40mL×1瓶，-20℃保存。
試劑二：液體10mL×1瓶，-20℃保存。
試劑三：液體20mL×1瓶，4℃保存。
試劑四：液體20mL×1瓶，4℃保存。
標(biāo)準(zhǔn)液：NaNO2標(biāo)準(zhǔn)儲備液1mL，10μmol/mL，-20℃保存。
誘導(dǎo)劑應(yīng)用液的配制：用時將誘導(dǎo)劑儲備液稀釋10倍，即取10mL誘導(dǎo)劑儲備液加90mL蒸餾水，充分混勻。
標(biāo)準(zhǔn)液的配制：將標(biāo)準(zhǔn)儲備液用蒸餾水稀釋為1.5、1.0、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1μmol/mL 濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液 。
產(chǎn)品說明：
NR（ EC 1.7.1.3）廣泛存在于植物中，是植物硝態(tài)氮轉(zhuǎn)化為氨態(tài)氮的關(guān)鍵酶，也是誘導(dǎo)酶，對作物的產(chǎn)量和品質(zhì)有影響。
NR催化硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，NO3ˉ+NADH+H＋→ NO2ˉ +NAD＋+H2O；產(chǎn)生的亞硝酸鹽能夠在酸性條件下，與對–氨基ben磺酸α-萘胺定量生成紅色偶氮化合物；生成的紅色偶氮化合物在540 nm有大吸收峰，可用分光光度法測定。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
操作步驟：
一、樣品測定的前處理
1、取適量誘導(dǎo)劑于燒杯中，將新鮮標(biāo)本洗凈，濾紙吸干，放入誘導(dǎo)劑應(yīng)用液中（淹沒即可），浸泡2h，取出樣本，濾紙吸干后，-20℃冷凍30min，取出樣本，濾紙吸干。（根據(jù)需要進行誘導(dǎo)處理）
2、稱取約0.1g樣本，加入1mL提取液，冰浴研磨，4000g，4℃離心10min，取上清置冰上待測。
二、測定步驟
1、分光光度計預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長540nm，蒸餾水調(diào)零。
2、樣本測定（在EP管中加入下列試劑）
| 試劑名稱（μL） | 加樣孔 | |||
| 測定管 | 對照管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 空白管 | |
| 樣本 | 100 | 100 | ||
| 標(biāo)準(zhǔn)溶液(μmol/mL) | 100 | |||
| 雙蒸水 | 100 | |||
| 試劑一 | 375 | 375 | 375 | 375 |
| 試劑二 | 125 | 125 | 125 | |
混勻后，37℃（哺乳動物）或25℃（其它物種）水浴30min
| 試劑二 | 125 | |||
| 試劑三 | 250 | 250 | 250 | 250 |
| 試劑四 | 250 | 250 | 250 | 250 |
混勻，顯色20min，4000g 常溫離心10min，取上清，540nm下比色，計算A測定-A對照。
注意：空白管只需測一次。
三、NR活性計算：
1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：
以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為x軸，以ΔA（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管）為y軸繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到線性回歸方程y=kx+b。將（A測定-A對照）帶入方程中，計算出x（μmol/mL）。
2. NR活性的計算：
（1）按樣本鮮重計算：
單位定義：每小時每g鮮重樣品中催化產(chǎn)生 1μmol NO2ˉ的量為一個 NR活力單位。
NR（U/g 鮮重）=x×V樣品÷(W÷V樣總×V樣品)÷T= 2x÷W。
（2）按樣本蛋白濃度計算：
單位定義：每小時每mg組織蛋白催化產(chǎn)生 1μmol NO2ˉ的量為一個 NR活力單位。
NR（U/mg prot）=x×V樣品÷（V樣品×Cpr）÷T=2x÷Cpr。
V樣品：吸取樣本體積，0.1mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；T：反應(yīng)時間，0.5h；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本鮮重，g。
相關(guān)文獻：
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《Knockout of SlSBPASE Suppresses Carbon Assimilation and Alters Nitrogen Metabolism in Tomato Plants》 作者:Fei Ding, Qiannan Hu, Meiling Wang and Shuoxin Zhang 期刊:International Journal of Molecular Sciences 影響因子:4.183 PMID:30558146
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硝酸還原酶（NR）檢測測試盒 氮代謝
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