甲苯胺藍(lán)染色液(硼酸鹽法)

    甲苯胺藍(lán)(Toluidine Blue O)是一種常用的人工合成染料, 屬于醌亞胺染料類(lèi)。這類(lèi)染料主要含有胺基和醌型苯環(huán)兩個(gè)發(fā)色團(tuán)，從而成色原顯色。甲苯胺藍(lán)中的陽(yáng)離子有染色作用, 組織細(xì)胞的酸性物質(zhì)與其中的陽(yáng)離子相結(jié)合而被染色。甲苯胺藍(lán)不僅含有兩個(gè)發(fā)色團(tuán)，還含有兩個(gè)助色團(tuán)，能促使染料產(chǎn)生電離成鹽類(lèi), 幫助發(fā)色團(tuán)對(duì)組織產(chǎn)生染色力, 使切片上的組織細(xì)胞著色，可染細(xì)胞核使之呈藍(lán)色；肥大細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)含有肝素和組織胺等異色性物質(zhì)遇到甲苯胺藍(lán)可呈異染性紫紅色。甲苯胺藍(lán)染色液(Toluidine Blue，0.5%,硼酸鹽法)由于硼酸鹽緩沖液呈強(qiáng)堿性，更利于組織細(xì)胞的著色。

操作說(shuō)明：（僅供參考）

(一)肥大細(xì)胞染色

1、脫蠟蒸餾水。

2、根據(jù)切片厚度和組織的不同，浸染于甲苯胺藍(lán)染色液。

3、蒸餾水或去離子水輕輕沖洗。

4、 (可選)0.5%冰乙酸分化，直到細(xì)胞核和顆粒清晰可見(jiàn)。

5、快速95%和無(wú)水乙醇脫水。

6、二甲苯透明，封固。

染色結(jié)果：肥大細(xì)胞呈紫紅色；背景呈淡藍(lán)色。

(二)軟骨染色

1、石蠟切片入二甲苯2次。

2、系列乙醇各。

3、自來(lái)水洗2min。

4、入Toluidine Blue O Stain浸染。

5、自來(lái)水洗2min，濾紙吸干水分。

6、丙酮分化軟骨細(xì)胞呈紫藍(lán)色清楚可見(jiàn)。

7、逐級(jí)乙醇脫水。

8、二甲苯透明，中性樹(shù)膠封固。

染色結(jié)果：軟骨、成骨細(xì)胞呈紫紅色；背景呈淡藍(lán)色。

(三)細(xì)胞涂片染色

1、用20%的乙醇溶液稀釋甲苯胺藍(lán)染色液, 一般要求稀釋到0.1%即可。

2、細(xì)胞涂片后，立即放入95%的乙醇中固定，取出放在紙巾上。

3、滴加稀釋后的甲苯胺藍(lán)染色液進(jìn)行滴染，加蓋玻片讓染料滲透到細(xì)胞中。

4、后將玻片豎起，稍加壓力，使多余染料被紙巾吸去。

5、無(wú)需干燥，直接鏡檢。

染色結(jié)果：細(xì)胞核、淋巴細(xì)胞呈深藍(lán)色；核仁呈紫紅色；紅細(xì)胞呈橘紅；細(xì)胞質(zhì)、單核細(xì)胞呈淡藍(lán)色。

(四)原位雜交染色

1、用蒸餾水或去離子水稀釋到相應(yīng)的濃度，憑經(jīng)驗(yàn)一般稀釋比例大于1:100。

2、玻片在稀釋好的染色液中短暫浸泡。

3、在蒸餾水或去離子水浸泡數(shù)次。

4、按需求進(jìn)行壓片固定。

注意事項(xiàng)：

1、*次使用本試劑時(shí)建議先取1-2個(gè)樣品做預(yù)實(shí)驗(yàn)。

2、針對(duì)于胃粘膜組織、軟骨組織等較難著色組織的染色，浸染于甲苯胺藍(lán)染色液的時(shí)間應(yīng)相應(yīng)延長(zhǎng)。

3、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

相關(guān)文獻(xiàn)：

《Loading icariin on titanium surfaces by phase-transited lysozyme priming and layer-by-layer self-assembly of hyaluronic acid/chitosan to improve surface osteogenesis ability》 作者:Yunjia Song,Aobo Ma,Jia Ning,Xue Zhong,Qian Zhang,Xu Zhang,Guang Hong,Ying Li,and Changyi Li 期刊:International journal of nanomedicine 影響因子:4.37 PMID:30425487
《Electroacupuncture promotes peripheral nerve regeneration after facial nerve crush injury and upregulates the expression of glial cell-derived neurotrophic factor》 作者:Jing Fei, Lin Gao, Huan-Huan Li, Qiong-Lan Yuan,and Lei-Ji Li, MD 期刊:Neural Regeneration Research 影響因子:2.472 PMID:30632508
 

甲苯胺藍(lán)染色液(硼酸鹽法)訂購(gòu)說(shuō)明：

1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨，一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。 
2、部分非常用產(chǎn)品，需提前1－2日預(yù)訂，海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。 
3、部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期、批次等因素發(fā)生變化，若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日新價(jià)格為準(zhǔn)。 
4、每日訂單截止時(shí)間為16點(diǎn)整，部分城市可到17點(diǎn)整，因超過(guò)截止時(shí)間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請(qǐng)辦理完貨款后，將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。

運(yùn)輸說(shuō)明：

1、極低溫產(chǎn)品：極低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝干冰運(yùn)輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來(lái)，再用泡沫盒密封，膠帶層層粘住泡沫盒，放入索萊寶的箱子，然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶(hù)的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
2、低溫產(chǎn)品：低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝索萊寶冰袋運(yùn)輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來(lái)，再使用泡沫盒密封，用膠帶嚴(yán)實(shí)密封泡沫盒，再放入索萊寶的箱子（保溫效果少可以持續(xù)一周），然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶(hù)的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
3、常溫產(chǎn)品：常溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中無(wú)需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫(kù)房人員快速配貨，準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中。