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小分子化合物的作用機(jī)制與應(yīng)用場(chǎng)景

更新時(shí)間:2025-11-19點(diǎn)擊次數(shù):340
  小分子化合物的作用是作為蛋白質(zhì)合成抑制劑,通過(guò)抑制蛋白質(zhì)合成來(lái)抑制細(xì)菌、藻類原生物和哺乳動(dòng)物細(xì)胞的生長(zhǎng),作用機(jī)制:嘌呤霉素是由白黑鏈霉菌發(fā)酵代謝產(chǎn)生的一種氨基糖苷類抗生素。其作用機(jī)制在于,嘌呤霉素是氨酰-tRNA分子3’末端的類似物,能夠與核糖體的A位點(diǎn)結(jié)合并摻入到延伸的肽鏈中。然而,嘌呤霉素同A位點(diǎn)結(jié)合后,不會(huì)參與隨后的任何反應(yīng),從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)合成的提前終止并釋放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟多肽。
  小分子化合物應(yīng)用場(chǎng)景:
  1.細(xì)胞穩(wěn)轉(zhuǎn)株篩選:
  嘌呤霉素產(chǎn)生菌Streptomyces alboniger內(nèi)發(fā)現(xiàn)的pac基因編碼嘌呤霉素N-乙酰轉(zhuǎn)移酶(PAC),賦予機(jī)體對(duì)嘌呤霉素產(chǎn)生抗性。這一特性如今普遍應(yīng)用于篩選特定攜帶pac基因質(zhì)粒的哺乳動(dòng)物穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株。
  在細(xì)胞穩(wěn)轉(zhuǎn)株篩選中,嘌呤霉素的普遍應(yīng)用與慢病毒載體的特性有關(guān)?,F(xiàn)在商業(yè)化的慢病毒載體多數(shù)都攜帶pac基因,使得篩選過(guò)程更加高效和準(zhǔn)確。
  在某些特定情況下,嘌呤霉素亦可以用來(lái)篩選轉(zhuǎn)化攜帶pac基因質(zhì)粒的大腸桿菌菌株。
  2.實(shí)驗(yàn)研究:
  嘌呤霉素可用于研究蛋白質(zhì)合成過(guò)程,通過(guò)觀察其對(duì)蛋白質(zhì)合成的影響,進(jìn)一步揭示蛋白質(zhì)合成的機(jī)制和調(diào)控途徑。
  在細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)等領(lǐng)域的研究中,嘌呤霉素也常被用作實(shí)驗(yàn)工具,以探究細(xì)胞生長(zhǎng)、分化、凋亡等生命過(guò)程。
  小分子化合物使用注意事項(xiàng):
  1.濃度控制:嘌呤霉素的有效篩選濃度跟細(xì)胞類型、生長(zhǎng)狀態(tài)、細(xì)胞密度、細(xì)胞代謝情況及細(xì)胞所處細(xì)胞周期位置等有關(guān)。為了篩選到穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞株,需要確定殺死未轉(zhuǎn)染/轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞的低濃度嘌呤霉素。
  2.操作安全:嘌呤霉素為有毒化合物,操作時(shí)請(qǐng)小心拿放,并穿實(shí)驗(yàn)服、戴一次性手套等防護(hù)措施。
  3.儲(chǔ)存條件:嘌呤霉素應(yīng)儲(chǔ)存于-20℃凍存條件下,以保持其穩(wěn)定性和活性。
 

 

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